厭氧培養(yǎng)箱簡(jiǎn)介

厭氧手套箱（Anaerobie glove box）即厭氧培養(yǎng)箱，是迄今為止國際上公認(rèn)的培養(yǎng)厭氧菌佳儀器之一。

它是一個(gè)密閉的大型金屬箱，箱的前面有一個(gè)有機(jī)玻璃做的透明面板，板上裝有兩個(gè)手套，可通過手套

在箱內(nèi)進(jìn)行操作，故名。

箱側(cè)有一交換室，具有內(nèi)外二門，內(nèi)門通箱內(nèi)先關(guān)著。欲放物入箱，先打開外門，放入交換室，關(guān)上外

門進(jìn)行抽氣和換氣（H2，CO2，N2）達(dá)到厭氧狀態(tài)，然后手伸入手套把交換室內(nèi)門打開，將物品移入

箱內(nèi)，關(guān)上內(nèi)門。箱內(nèi)保持厭氧狀態(tài)，也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。

該箱可調(diào)節(jié)溫度，本身是孵箱或孵箱即附在其內(nèi)，還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落，這種厭氧

箱適于作厭氧細(xì)菌的大量培養(yǎng)研究，大量培養(yǎng)基可放入作預(yù)還原和厭氧性無菌試驗(yàn)。金屬硬壁型厭氧箱

的抽氣、充氣、厭氧環(huán)境和溫度等均系自動(dòng)調(diào)節(jié)。

（一）結(jié)構(gòu)

共分為：厭氧室、傳輸艙、裸手袖套操作孔、氣路及電路控制系統(tǒng)四大部分。

1、厭氧室

內(nèi)腔機(jī)械強(qiáng)制對(duì)流與內(nèi)腔正壓，實(shí)現(xiàn)恒溫、控濕、除氧、生物脫毒四方面狀態(tài)穩(wěn)定均一，并且快速恢復(fù)，

操作培養(yǎng)同室進(jìn)行。

2、傳輸艙：

采用緊湊式筒狀設(shè)計(jì)，實(shí)現(xiàn)單人單手輕松轉(zhuǎn)移樣品。

3、裸手袖套操作孔：

無需進(jìn)行抽真空/充氮置換過程，雙手可直進(jìn)直出內(nèi)腔厭氧。

4、控制系統(tǒng)：

全方位實(shí)時(shí)狀態(tài)自檢報(bào)警功能，確保設(shè)備正常運(yùn)行。

（二）操作室厭氧環(huán)境形成

1.按使用要求放置好必要的配件和器具、并向操作室內(nèi)放入兩個(gè)無毒塑料袋。

2.混合氣瓶、氮?dú)馄枯斎雺毫φ{(diào)整，調(diào)節(jié)減壓閥，使輸入壓力為0.1Mpa

3.打開設(shè)備后配，電源開關(guān)后，按控制牌上的總電源鍵，使設(shè)備通電。

4.操作室放入1000g鈀粒（密封），由冷凝系統(tǒng)除濕，并放入?yún)捬踔甘緞?/span>

5.關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗(yàn)。（按控制面牌上真空泵鍵，按一下開，再按一下關(guān)）

6.操作室內(nèi)第一次置換（氮?dú)庵脫Q）：

①先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口，另一個(gè)插入塑料袋。

②接通氮?dú)膺M(jìn)氣路，打開操作室氮?dú)饪刂崎y，使兩只塑料袋充足氮?dú)夂?，關(guān)閉電磁閥，然后扎緊袋口。

③把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。

④把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸的放于操作室內(nèi)，至全部防除。

7.操作室第二次置換（氮?dú)庵脫Q）重復(fù)一次沖氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時(shí)按排氣閥關(guān)閉排氣。

8.操作室第三次置換（混合氣體置換） (混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%）

①調(diào)換氣路打開操作室混合氣閥進(jìn)氣，沖氣時(shí)取樣室先抽真空，并注意隨時(shí)按排氣閥關(guān)閉排氣。

②混合氣充滿塑料袋后，關(guān)閉電磁閥，并打開混合氣限流閥，使混合氣經(jīng)過穩(wěn)流器、流量計(jì)、調(diào)整流量

計(jì)，流量為每分鐘10毫升左右。

③把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。

④通過三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極為量狀態(tài)。

9.操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧，并在厭氧指示條反應(yīng)區(qū)上滴一點(diǎn)潔凈水，

1-2小時(shí)后，觀察其變色情況，反應(yīng)部分深藍(lán)色變?yōu)闇\藍(lán)為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境。

10.紫外線滅菌燈，室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理，滅菌時(shí)間自定。

（三）菌種的置入和培養(yǎng)

1.檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之。

2.打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外們

3.取樣室充氮置換三次過程，先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa)以上停，然后打開取樣室氧氣閥進(jìn)氣，使

指針回復(fù)零位，關(guān)掉閥。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束。

4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。

5.取樣室外門開啟、關(guān)緊后，再抽低真空度100毫米汞柱（13Kpa）檢驗(yàn)。

6.厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件

①每天在操作室內(nèi)放入美蘭指示條觀察，如不能正常就必須重新?lián)Q氣。

②要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體。使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康牡Y(jié)合通過催化吸收，保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài)

，補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。

③連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。（換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內(nèi)，干燥

2－3小時(shí)可使其復(fù)原）

7.接種棒滅菌器的應(yīng)用：

①隨時(shí)用鎳?yán)与姛峤z使電極短路而變赤熱以進(jìn)行殺菌（接種棒）。

②熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。

8.操作室理的培養(yǎng)箱理的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。

（四）注意事項(xiàng)

1．儀表盡可能地安裝于空氣清靜，溫度變化較小的地方。

2．開機(jī)前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。

3．培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到絕對(duì)厭氧環(huán)境后放入。

4．如發(fā)生故障（停氣等原因）操作室內(nèi)仍可保持12小時(shí)厭氧狀態(tài)。（超過12小時(shí)則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取

出另作處理）。

5．經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。

6．調(diào)換氣瓶時(shí)，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體

7．真空泵按要求使用，定期檢查加油。

8．停止使用，關(guān)閉總電源鍵，及設(shè)備后部的電源開關(guān)